菲思特生物新品发布:焦磷酸测序试剂盒
01 焦磷酸测序原理
焦磷酸测序技术是一种准确、定量、简便、快速的核酸序列测定技术。焦磷酸测序反应体系包括DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和三磷酸腺苷双磷酸酶等, 以及5′-磷酰硫酸(APS)、荧光素、待测序DNA单链和测序引物等。引物与模板单链DNA退火后,在DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和三磷酸腺苷双磷酸酶4种酶协同作用下,将特定的dNTP与单链互补聚合,并释放一次荧光信号。通过检测荧光的释放和强度,达到实时、定量测定DNA序列目的。

图一:焦磷酸反应原理
02 焦磷酸测序主要应用
1. SNP、插入、缺失、CNV等单链多态性研究;
2. DNA甲基化定量测定;
3. 病原微生物快速鉴定;
4. 其他核酸序列测定等。
03 产品规格及包装
规格:23测试/盒,46测试/盒,100测试/盒,200测试/盒,1000测试/盒。

图2 焦磷酸测序试剂盒
04 产品主要成分
DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和三磷酸腺苷双磷酸酶、APS、荧光素、碱基、水等。
05 配套技术平台
试剂应用于武汉菲思特生物科技有限公司PYROSEQ-E16焦磷酸测序仪、凯杰PyroMark Q96 、Q48焦磷酸测序仪等焦磷酸测序仪。
06 样本要求
全血、咽拭子、FFPE样本、体液、各种细胞组织、游离DNA等。
07 简要操作步骤(以菲思特焦磷酸测序仪为例)
1. PCR扩增、单链产物转移至测序管;测序管加入 3uL 测序酶和 3uL 测序底物。
2. 取dNTP 排管,依次加入 20μldATPαS、20μl dTTP、20μl dGTP、20μl dCTP。碱基平铺在排管底部。
3. 将清洗水槽、dNTP 排管、测序管放入测序仪指定位置。
4. 启动测序。
5. 测序结束单击“保存”按钮。单击“输出报告”输出基因型结果。

图3 相关试剂、设备例图

图4 检测结果解读示例
08 产品性能指标
准确性:99.95%以上;
重复性:CV≤2%;
测序长度:50bp以上;
最低检出限:0.1%。
菲思特生物聚焦于分子诊断和免疫诊断领域的技术产品开发、生产和市场推广,积极开拓海内外市场,诚邀合作,共谋发展。欢迎更多的合作伙伴就设备及配套试剂展开多样化的合作,菲思特将采取多种优惠政策全面助力各位合作伙伴乘风破浪,共创佳绩!
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